【标题】

“冷冻预处理温度对胎兔许旺细胞活性的影响*★”一文的动态图片

【来源】

《中国组织工程研究与临床康复》杂志，2011年，第15卷，第36期，6793-6796

【作者】

代秀松，吴  敏，张长春，徐  伟，肖玉周

【单位】

蚌埠医学院第一附属医院骨科，安徽省蚌埠市233004

【基金】

【摘要】

背景：许旺细胞作为周围神经损伤修复的重要桥接材料，其活性对临床修复周围神经损伤成功与否具有重要影响。
目的：观察不同维持温度冷冻预处理超深低温保存对胎兔许旺细胞活性的影响。
方法：设计胎兔许旺细胞冷冻维持温度为-30~-70 ℃，每间隔-5 ℃为一组，以10%二甲基亚砜为低温保护剂，对胎兔许旺细胞进行上述温度冷冻预处理，液氮中保存48 h，快速复温后继续培养48 h，透射电镜观察细胞超微结构改变，MTT法和3H-TdR掺入法检测细胞活性。
结果与结论：透射电镜下见-45 ℃处理的细胞超微结构良好，其余各温度组细胞均出现细胞器肿胀、坏死等轻重不同的冷冻损伤表现。MTT法和3H-TdR检测结果均显示-45 ℃冷冻预处理对许旺细胞的生长抑制率最低，分别为(3.83±0.56)%、(4.41±0.71)%，和其余各温度组之间相比，差异有显著性意义(P < 0.05)。提示-45 ℃是胎兔许旺细胞冷冻预处理的最佳维持温度值，对细胞活性影响最小，可较好保持其生物学活性。

【关键词】

关键词：许旺细胞；冷冻预处理；维持温度；活性；胎兔

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图1  许旺细胞S100免疫组织化学染色(×100)
图2  -30 ℃冷冻预处理，细胞核核膜完整，完整细胞器少见，胞浆中可见大量成簇的溶酶体及细胞碎片(电镜观察，8 000×2)
图3  -45 ℃冷冻预处理，细胞核圆形，染色质分布均匀，胞质内见线粒体、粗面内质网等细胞器，细胞结构基本正常(电镜观察，5 000×2)
图4  -70 ℃冷冻预处理，细胞核部分溶解，胞质中多见细胞碎片及髓鞘样结构(电镜观察，6 000×2)

【全文】